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柱層層析硅膠廠家講解色譜分離技術

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柱層層析硅膠廠家講解色譜分離技術

2019-08-30

色譜分離技術又稱層析分離技術或色層分離技術,是一種分離復雜混合物中各個組分的有效方法。它是利用不同物質在由固定相和流動相構成的體系中具有不同的分配系數,當兩相作相對運動時,這些物質隨流動相一起運動,并在兩相間進行反復多次的分配,從而使各物質達到分離。

      色譜有多種,按固定相類型和分離原理可分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、親和色譜、大孔吸附樹脂、凝膠色譜、聚焦色譜等。常用的是吸附色譜分離技術。

     吸附色譜法是指混合物隨流動相通過吸附劑(固定相)時,由于吸附劑對不同物質具有不同的吸附力而使混合物中各組分分離的方法。此法特別適用于脂溶性成分的分離。被分離的物質與吸附劑、洗脫劑共同構成吸附層析的三要素,彼此緊密相連。

柱層層析硅膠廠家講解色譜分離技術

      常用的極性吸附劑有:硅膠、氧化鋁。硅膠顯弱酸性,適于分離酸性和中性化合物,分離生物堿時需在流動相中加入適量的有機堿;氧化鋁呈堿性,適于分離生物堿等堿性成分,不宜用于分離有機酸等酸性成分。極性吸附劑的吸附作用有以下特點。 

     1.被分離物質極性越強,吸附力越強。強極性溶質將優先被吸附。

     2.溶劑極性越弱,則吸附劑對溶質的吸附能力越強。隨溶劑極性的增強,則吸附劑對溶質的吸附力將減弱。

     3.當加入極性較強的溶劑后,先前被硅膠或氧化鋁所吸附的溶質可被置換而洗脫出來。

     活性炭是常用的非極性吸附劑?;钚蕴繉Ψ菢O性物質具有較強的親和力,在水中對溶質表現出強的吸附能力。從活性炭上洗脫被吸附的物質時,溶劑的極性越小,洗脫能力越強。

柱層層析硅膠廠家講解色譜分離技術

     一般化合物的極性按下列官能團的順序增強:

        —CH2—CH2—,—CH==CH—,—OCH3,—COOR,>C==O,—CHO,—NH2,—OH,—COOH。

    溶劑的極性可大體根據介電常數的大小來判斷。介電常數越大,則極性越大。一般溶劑的介電常數按以下順序增大:環已烷(1.88),苯(2.29),無水乙醚(4.47),氯仿(5.20),乙酸乙酯(6.11),乙醇(26.0),甲醇(31.2),水(81.0)。

     吸附色譜的操作方式主要有薄層色譜法和柱色譜法。薄層色譜法是將吸附劑均勻鋪在玻璃上,點樣,然后用合適的展開劑展開而達到分離、鑒定和定量的目的。柱色譜是將待分離的樣品均勻加入到裝有固定劑填料的柱子內,再以適當的洗脫劑洗脫以達到不同成分的分離。 

    色譜分離技術常用于功能性的分離精制。例如,柱層層析硅膠廠家從茶葉中提取茶多酚時可采用層析法分離除去咖啡因及其他不純物;從橘皮的超臨界萃取液中分離提取類胡蘿卜素;從芝麻粕提取液中分離提取木聚糖;從蔗糖的酶處理液中分離精制低聚果糖;從牛初乳中分離提取乳鐵蛋白;從磷蝦酶解殘渣抽提液中分離提取蝦黃素、卵磷脂等。


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